مقایسه میزان تولید پروتئین نوترکیب در دو رده سلولی cho و mcf۷
نویسندگان
چکیده
مقدمه: هدف ازمطالعه ی حاضر، مشخص نمودن رده سلولی مناسب تر، جهت مطالعات تولید پروتئین در سیستم های یوکاریوتی می باشد. پس از ترانسفکشن، تغییرات ایجاد شده در سطوح بیانیrna و پروتئین نوترکیب هدف ارزیابی شد. مواد و روش ها: به منظور بررسی بیان ژن مورد نظر و تولید پروتئین نوترکیب e6 پاپیلوما ویروس انسانی تیپ 16 در سلول های مورد آزمایش، از پلاسمید نوترکیب pcdna3-e6 و نیز دو رده سلولی متفاوت mcf7 و cho استفاده گردید. به این منظور به دنبال ترانفکشن، بیانrna و پروتئین هدف بوسیله واکنش زنجیره ای پلیمراز معکوس (rt-pcr) و آزمایش لکه گذاری وسترن با استفاده از ژل sds-page و مونوکلونال آنتی بادی anti-e6 ارزیابی گردید. یافته ها: در این مطالعه به دلیل غلظت بسیار پایین پروتئین تولیدی در سلول های mcf7 ، آزمایش rt-pcr مثبت و آزمایش وسترن بلاتینگ آن منفی شد، این در حالی است که در رده سلولی cho هر دو آزمایش ذکر شده مثبت شدند بحث و نتیجه گیری: با توجه به نتایج بدست آمده توصیه می شود از سلول cho به منظور ترانسفکشن و تولید پروتئین نوترکیب در سیستم هایی که تولید بالای پروتئین امکان پذیر نیست استفاده گردد
منابع مشابه
مقایسه میزان تولید پروتئین نوترکیب در دو رده سلولی CHO و MCF7
Background : The aim of the present study was to identify a suitable cell line for studies of recombinant protein production in eukaryotic system. After transfection, altered expression levels of RNA and its target protein were analyzed. Materials and Methods: To investigate the in vitro expression of E6 protein of human papillomavirus type 16 in cell culture, the plasmid pcDNA3-E6, and two di...
متن کاملکلون سازی و بیان ژن هیرودین نوترکیب در رده سلولی CHO
هیرودین پروتئینی به طول 66-65 اسیدآمینه می باشد که از غدد بزاقی زالو ترشح و به عنوان یک داروی ضدانعقاد مطرح است. این دارو مهارکننده بسیار قوی ترومبین بوده و در ممانعت از ترومبوسهای عروقی موثر است. هدف از این تحقیق بررسی بیان ژن هیرودین در سلول های CHO به عنوان یک سلول یوکاریوتی بود. در مطالعه حاضر، قطعه 221 بازی ژن هیرودین در وکتور pcDNA3.1(+) کلون گردید. وکتور نوترکیب هیرودین در سلول CHO با ا...
متن کاملجداسازی، کلونینگ و بیان ژن فاکتور VII انعقادی نوترکیب انسانی در رده سلولی CHO
جداسازی، کلونینگ و بیان ژن فاکتور VII انعقادی نوترکیب انسانی در رده سلولی CHO راحله حلبیان1، ناصر شاگردی اسماعیلی2، آرزو اوودی2، ناصر مسروری3، دکتر ناصر امیری‌زاده4، دکتر کامران موسوی حسینی5، دکتر احمد قره‌باغیان6، دکتر حوری رضوان7، دکتر محمد علی جلیلی8، دکتر مهریار حبیبی رودکنار9 چکیده سابقه و هدف فاکتور VII ، یک گلیکوپروتئین پلاسمایی است که در آبشار انعقادی تشکیل فیبرین، شرکت دارد....
متن کاملافزایش تولید هورمون رشد انسانی نوترکیب در سلول‌های CHO از طریق کنترل شرایط کشت سلولی
هدف: هدف این مطالعه افزایش تولید هورمون رشد انسانی توسط اضافه کردن ترکیبات شیمیایی به محیط کشت فاقد سرم سلول‌های CHO و بررسی خواص hGH تولید شده می‌باشد. مواد و روش‌ها: در این مطالعه، تاثیر تیمارهای مختلف شامل غلظت‌های مختلف گلیسرول،DMSO ، NaBu و ZnSO4 در سلول‌های CHO مورد بررسی قرار گرفت و تولید GH بهروش الایزا سنجیده شد.سلول‌ها به هر چاهک یک پلیت 12 خانه حاوی DMEM-F12 و FBS10 درصد اضافه شدند...
متن کاملجداسازی، کلونینگ و بیان ژن فاکتور vii انعقادی نوترکیب انسانی در رده سلولی cho
جداسازی، کلونینگ و بیان ژن فاکتور vii انعقادی نوترکیب انسانی در رده سلولی cho راحله حلبیان1، ناصر شاگردی اسماعیلی2، آرزو اوودی2، ناصر مسروری3، دکتر ناصر امیری زاده4، دکتر کامران موسوی حسینی5، دکتر احمد قره باغیان6، دکتر حوری رضوان7، دکتر محمد علی جلیلی8، دکتر مهریار حبیبی رودکنار9 چکیده سابقه و هدف فاکتور vii ، یک گلیکوپروتئین پلاسمایی است که در آبشار انعقادی تشکیل فیبرین، شرکت دارد. فاکتور vii...
متن کاملهمسانهسازی و بیان ژن نوترکیب CD40Lانسانی در رده سلولی HEK293
چکیده سابقه و هدف CD40L ، پروتئینی غشایی و یکی از اعضای خانواده TNF است که نقش مهمی در انتقال پیام سلولی در ایمنی ذاتی و تطبیقی دارد. از آن جایی‌که این پروتئین نقش خود را از طریق تجمع گیرنده در سطح سلول هدف ایفا می‌کند، به نظر می‌رسد فرم مالتی‌‌مری آن بتواند اثر قوی‌تری نسبت به فرم طبیعی ترایمری ایجاد کند. بر این اساس در این مطالعه کلونینگ و بیان فرم کایمری و دودکامری CD40L محلول، از طریق پر...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
عنوان ژورنال:
یافتهجلد ۱۶، شماره ۲، صفحات ۹۹-۱۰۶
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023